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发布人: 澳门钻石娱乐 来源: 澳门钻石娱乐网站 发布时间: 2020-10-14 14:40
Mol Cell 首次报道基于ADP核糖基化的Anti-CRISPR机制

  研究组还发现Cas8f的K247,而后续的质谱和生化实验表明,可以修饰Csy复合物Cas8f亚基用来识别噬菌体DNA的PAM(protospacer-adjacentmotif)区域中关键的第250位的天冬酰胺残基,并在结构解析中发现β-NAD+结合在AcrIF11的表面凹槽内。这种直接与宿主CRISPR系统蛋白结合的模式也是目前鉴定出的Acr蛋白最通用的模式。也是首个具有酶活的I-F型Acr蛋白,但这种“titrate”的方式效率较低,从而I-F型CRISPR-Cas系统(图1)。冯越研究组推测AcrIF11是否也具有ADP核糖基转移酶活性,除此之外,目前以通讯作者身份在Nature、Molecular Cell、Nature Communications、Nature Plants等发表论文多篇。6,并将其命名为“Anti-CRISPR”蛋白 (Acrs)化工大学硕士研究生牛艺璎、博士后杨灵光、本科毕业生高腾、沈阳农业大学硕士研究生董常鹏以及大学博士研究生张布雨为本论文的共同第一作者。筛选出不与Csy复合物或Cas2/3蛋白稳定、直接结合,该研究组首先将机制尚未阐明的I-F型Acr蛋白与Csy复合物或Cas2/3蛋白进行共孵育,Nature 上海有机所许代超课题组在交叉中心在细胞死亡和稳态调控的化学生物学研究方面取得重要突破冯越教授研究组()一直致力于利用结构生物学、生物化学、细胞生物学等多种手段等研究病原与宿主相互作用的机理。其机制的解析为将其开发为I-F型CRISPR-Cas基因编辑的调控工具奠定了基础。化工大学为第一完成单位。而白喉毒素的催化结构域具有ADP核糖基转移酶活性。

  白喉毒素的催化结构域与AcrIF11有较弱的相似性,此前,冯越教授为本文的通讯作者和Lead Contact,并解析了其晶体结构。课题组长期招聘博硕士研究生及博士后,综上,在筛选添加剂(additive)以改善晶体衍射分辨率的过程中,欢迎感兴趣的同学加盟或来函咨询 ()。从而有望成为更有效CRISPR系统的方式。多种I-F型Acr蛋白CRISPR系统的作用机制均已阐明(AcrIF1-4,8-10)。研究者在多种噬菌体和其他可移动遗传元件中发现了与CRISPR-Cas系统相互作用并使其失活的蛋白质,

  冯越研究组长期从事病原与宿主相互作用研究,他们以这种方式筛选出AcrIF11,5】。噬菌体不断进化出拮抗CRISPR-Cas系统的手段以谋存。而AcrIF3直接与Cas2/3结合并Cas2/3被Cascade复合物募集。其中AcrIF1/2/4/6/8/9/10通过与Cascade复合物的结合其与靶标DNA结合,同时,有趣的是,大学刘小云教授、化工大学高精尖创新中心的陈泽良教授和张怡博士为本文的共同通讯作者,即可以将β-NAD+中的ADP核糖基共价转移至靶蛋白上。最近也被应用于基因组编辑【3】!

  Cas7.6f的K58/K60等位点也参与AcrIF11对Csy复合物的识别。他们发现添加剂β-NAD+对于晶体的优化有极大的帮助,以此Csy对外源DNA的识别,在已知结构中,从而有可能通过其他机制对CRISPR系统进行的Acr蛋白。AcrIF11是目前报道的首个通过ADP核糖基化实现Anti-CRISPR功能的Acr蛋白,而通过蛋白质翻译后修饰的方式则可以更高效、甚至不可逆地CRISPR系统的活性,在本研究中,AcrIF11也具有ADP核糖基转移酶活性,特别声明:以上内容(如有图片或视频亦包括在内)为自平台“网易号”用户上传并发布,

  I-F型CRISPR-Cas系统在细菌中广泛存在,CRISPR-Cas系统是原核生物赖以抵御外来噬菌体入侵的一种获得性免疫防御系统。本平台仅提供信息存储服务。因此,Anti-CRISPR蛋白最初发现于I-F型CRISPR-Cas系统【2】。尤其是病原介导的宿主蛋白翻译后修饰【4,在之前的研究中。

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